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全自动蛋白纯化仪器——全自动蛋白质提取纯化的方法有哪些?
2020-07-21
全自动蛋白纯化仪器的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛。全自动蛋白纯化仪器要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。
根据蛋白质溶解度不同,全自动蛋白纯化仪器的分离纯化可分为盐析法和等电点沉淀法。盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使溶解的物质析出的过程。如:向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出。这是一种物理变化,可复原。
等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度极低,而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离提取的方法。全自动蛋白纯化仪器在等电点时,蛋白质分子以离子形式存在,其分子净电荷为零,此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度极小,最易形成沉淀物。
需要注意的是,不同的蛋白质,具有不同的等电点。在全自动蛋白纯化仪器生产过程中应根据分离要求,除去目的产物之外的杂蛋白;若目的产物也是蛋白质,且等电点较高时,可先除去低于等电点的杂蛋白。同一种蛋白质在不同条件下,等电点不同。
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