全自动蛋白纯化仪器——全自动蛋白纯化进程中蛋白质活性丢失的处理方法

在全自动蛋白纯化仪器使用过程中，出现了蛋白质失去活性这种情况时，需要仔细分析情况，以查明原因。更为重要的是，应该仔细计算酶单位，以评估活力损失的程度。对于许多全自动蛋白纯化仪器步骤，蛋白质活性损失的情况对每个蛋白质是不一样的。

如果在全自动蛋白纯化仪器的某一个纯化步骤蛋白质的活性完全丧失，首先需要考虑可能是在某些情况下, 蛋白质可能与层析柱结合得非常紧密，需要使用更加极端的洗脱程序。根据层析的类型，可能需要增加离子强度，使用一个离液序列比较高的盐 （如 KBr），或在洗脱液中加入去污剂或乙二醇。

第二种可能是蛋白质活性的发挥需要多个组分, 这些组分在全自动蛋白纯化仪器分级分离过程中被除去了。因此，无论哪个组分本身处于无活性状态，只有当所有组分都出现时，才能观察到活性状态。要测试这种可能性，可以混合上一步骤的前一步中的所有组分，再检测其活性。在某些情况下，混合所有组分后，如果再次检测到活性，则必须以配对的方式检测这些组分或组分群。

有时在全自动蛋白纯化仪器的纯化步骤之间蛋白质可能会丧失活性，如在透析或浓缩过程中，或甚至在存储过程中。对于前者，应该再次检测除去一种可能需要的组分所产生的结果。也有这样的可能性，就是蛋白质依附在全自动蛋白纯化仪器的透析管或浓缩膜上。对此，用含有一定去污剂的缓冲液冲洗这些管或膜可能会有所帮助。存储过程中的稳定性问题在上面已经有所讨论。