重组蛋白GFP分离纯化实验

仪器推荐

                SDA系列                                    SCG-P系列

层析填料：

NW Rose Ni FF (M07D2203)  CV:1mL

样品：

GFP发酵液经破碎离心上清液，按照20mg/mL载量上样

缓冲液：

平衡液:  20mM Tris-HCl 0.5M NaCl PH7.5

淋洗液:  20mM Tris-HCl 0.5M NaCl PH7.5

洗杂液1: 20mM Tris-HCl 0.5M NaCl 0.5M咪唑 PH7.5，20%

洗脱液1: 20mM Tris-HCl 0.5M NaCl 0.5M咪唑 PH7.5，55%

洗脱液2: 20mM Tris-HCl 0.5M NaCl 0.5M咪唑 PH7.5

流速：

0.3ml/min

运行方法：

平衡5CV--上样--淋洗5CV--洗杂5CV--洗脱①5CV—洗脱②5CV--平衡5CV

仪器推荐

                  SDA系列                                  SCG-P系列

层析填料：

UniHR Butyl 30L( L01W15KB)  CV:1mL

样品：

亲和洗脱液调节，Cond、pH与平衡液一致，全部上样

缓冲液：

平衡液：20mM Tris-HCl + (NH4)2SO4 PH7.5,Cond60ms/cm

洗脱液：20mM Tris-HCl

再生液：0.1M NaOH

流速：

0.3ml/min

运行方法：

平衡5CV--上样--再平衡5CV--洗脱5CV--CIP5CV--平衡5CV

收集流穿液检测收率74.7%

仪器推荐

                 SDA系列                                SCG-P系列

层析填料：

G-25 CV:53mL

样品：

GFP疏水流穿液

缓冲液：

平衡液: 20mM Tris-HCl，PH7.5

流速：

0.3ml/min

运行方法：

平衡-上样--淋洗