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DOE功能你会用了吗?
2024-11-21
做纯化的小伙伴们都清楚,蛋白质纯化的工艺优化是一个涉及许多因子的综合实验,其中的因子如样品组成、浓度和体积、纯化技术、层析填料、结合模式以及清洗、洗脱条件(包括 pH、离子强度、温度和添加剂)都可能会发挥作用。面对如此多的可变因子,在工艺开发期间如何快速筛选出关键因子,确定纯化工艺,一直是困扰我们的难题。
赛谱仪器全新PURfect P®层析工作站完美集成DOE功能,用最小的实验投入,经过智能分析,获得最优的工艺条件和结果。

PURfect P®层析工作站直接集成了DOE实验设计软件,即可以实现一站式的设计、运行和数据分析,大大简化了实验设计的流程。下面我们就以简单的案例让您快速上手DOE功能。

案例
DOE在脱盐实验中的应用
01
实验设计:
针对某款脱盐柱进行实验,考察其不同条件下脱盐率以及收率。通过设置不同的流速、进样量和结束收集UV水平,以及正反向操作,可以系统地研究脱盐效果的变化规律。

在DOE实验中,流速、进样量和结束收集UV水平,以及层析柱正反向冲洗是我们考虑的4个因素,因此我们把这4个变量设置成X;以脱盐率和收率为响应值。
| 因子 | 水平 | |
| 流速 | 1mL/min | 3mL/min |
| 进样量 | 1mL | 4mL |
| 结束收集uv | 50mAU | 500mAU |
| 正反向 | 正向 | 反向 |
全析因设计,模型中一共包含22个实验,还有额外的点来解决曲率效应。实验设计及结果如下图所示:

02
数据统计分析
Report 脱盐率

从结果来看,脱盐率与进样量、结束收集UV水平相关性大,与流速和层析柱正反向无明显相关性。
Report 收率

从结果来看,收率与进样量、结束收集UV水平相关性大,与流速和层析柱正反向无明显相关性
03
结果预测
根据DOE实验模型,进行结果预测。
上样1.5mL,流速2mL/min,层析柱正向,收集截止UV 50mAU,推算收率75.5%,脱盐率94.2%。实际测量收率76.45%,脱盐率93.49%,结果十分接近。

收率76.45% 脱盐率93.49%
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