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蛋白质纯化的有机溶剂提取
2020-03-05
蛋白质的别离纯化在生物化学研讨运用中运用广泛,是一项重要的操作技能。SCG蛋白纯化系统公司—赛谱仪器有为大家整理了蛋白质纯化的有机溶剂提取内容。一个典型的真核细胞能够包含数以千计的不同蛋白质,一些含量非常丰厚,一些仅含有几个复制。为了研讨某一个蛋白质,有必要首要将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。
蛋白纯化离子交换层析法有剂和离子交换剂当被分别的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改动pH或方法将吸附的蛋白质洗脱下来。
有机溶剂提取
蛋白质纯化有机溶剂提取的原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著下降;并且在必定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉积的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分别纯化蛋白质。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢参与乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白分出,然后纯化冰核蛋白。因为在室温下,有机溶剂不只能引起蛋白质的沉积,并且伴随着变性。
因此,一般要将有机溶剂冷却,然后在不断搅拌下参与有机溶剂防止部分浓度过高,蛋白质变性问题就可以很大程度上得到解决。关于一些和脂质结合比较健壮或分子中极性侧链较多、不溶于水的蛋白质,可以用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂提取,它们有必定的亲水性和较强的亲脂性,是志向的提取液。
冷乙醇分别法提取免疫球蛋白最早由Cohn于1949年提出,用于制备丙种球蛋白。冷乙醇法也是WHO规程和我国生物制品规程引荐的方法,不只分辨率高、提纯作用好、可一同分别多种成分,并且有抑菌、铲除和灭病毒的作用。
苏州赛谱仪器有限公司提供蛋白纯化系统、蛋白层析系统、高压制备液相,质量可靠,值得信赖!价格咨询:18151128155。
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