蛋白质纯化的前处理

　　蛋白质的别离纯化在生物化学研讨运用中运用广泛，是一项重要的操作技能。SCG蛋白纯化系统公司—赛谱仪器有为大家整理了蛋白质纯化的前处理内容。一个典型的真核细胞能够包含数以千计的不同蛋白质，一些含量非常丰厚，一些仅含有几个复制。为了研讨某一个蛋白质，有必要首要将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。

　　分离纯化某种蛋白质，首要要把蛋白质从正本的组织或细胞中以溶解的状况释放出来并坚持正本的天然状况，不丢掉生物活性。为此，动物材料应先除掉结缔组织和脂肪组织，种子材料应先去壳乃至去种皮以免受单宁等物质的污染，油料种子最好先用低沸点的有机溶剂如乙醚等脱脂。

　　然后根据不同的状况，选择恰当的方法，将组织和细胞破碎。动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆机破碎或用超声波处理破碎。植物组织和细胞因为具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁，一般需要用石英砂或玻璃粉和恰当的提取液一同研磨的方法或用纤维素酶处理也能到达目的。

　　细菌细胞的破碎比较费事，因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一个借共价键衔接而成的肽聚糖囊状大分子，非常坚韧。破碎细菌细胞壁的常用方法有超声波破碎，与砂研磨、高压揉捏或溶菌酶处理等。组织和细胞破碎后，选择恰当的缓冲液把所要的蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除掉。

　　假设所要的蛋白首要会合在某一细胞组分，如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等，则可运用差速离心的方法将它们分隔，收集该细胞组分作为下步纯化的材料。假设碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的，则有必要运用超声波或去污剂使膜结构解聚，然后用恰当介质提取。

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