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蛋白纯化的原则是什么

2017-12-6 10:32:05 点击数:463

  SCG蛋白纯化系统公司—赛谱仪器有为大家整理了关于蛋白纯化的原则的内容。

蛋白纯化的原则是什么

  蛋白纯化要运用不同蛋白间内在的相似性与差异,运用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而运用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,运用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。
  蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化选用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分隔,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分隔,必要时可参加相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解。
  精细纯化阶段则需求更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质靠近的蛋白区分隔来,要用更小的树脂颗粒以进步分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要概括考虑树脂的选择性和柱效两个要素。
  选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上会合洗脱的才能,洗脱峰越窄,柱效越好。仅有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有用分离。
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