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蛋白纯化设备的工作原理和注意事项

蛋白纯化设备的工作原理和注意事项

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  • 发布时间:2020-06-30 16:02
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【概要描述】蛋白纯化设备​广泛应用于生物化学研究应用领域,是重要的操作技术。典型的真核细胞含有数千种不同的蛋白质,有些很丰富,有些只包含几个拷贝。要研究某种蛋白质,必须先从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出该蛋白质。

蛋白纯化设备的工作原理和注意事项

【概要描述】蛋白纯化设备​广泛应用于生物化学研究应用领域,是重要的操作技术。典型的真核细胞含有数千种不同的蛋白质,有些很丰富,有些只包含几个拷贝。要研究某种蛋白质,必须先从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出该蛋白质。

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蛋白纯化设备广泛应用于生物化学研究应用领域,是重要的操作技术。典型的真核细胞含有数千种不同的蛋白质,有些很丰富,有些只包含几个拷贝。要研究某种蛋白质,必须先从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出该蛋白质。

 

蛋白纯化设备利用颗粒不同程度的颗粒吸附力来使分离的目的达到蛋白质的选择吸附分离。蛋白纯化设备采用低温有机溶剂沉淀法,使用如甲醇,乙醇等与水可混溶的有机溶剂,降低多数蛋白质的溶解度并且将其析出,和盐析相比较,这种方法的分辨率更加的高,然而蛋白质比较容易变形,需要在低温下进行。

蛋白纯化设备

蛋白纯化设备还吸取按照分子大小不一样的方法,在介质中对蛋白质离心时,蛋白质沉降速度取决于它的质量和密度,质量和密度越大,那么沉降越快;凝胶过滤(一种柱层析);超过滤(利用蛋白质分子不能从半透膜通过的性质)。

 

蛋白纯化设备使用注意事项:

1.为了避免蛋白质变性,不要对样品剧烈搅动和反复冻融。

2.缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环。

3.在纯化分离过程中,均必须时刻对它的稳定性注意维护,使它的活性得到保护,要注意避免蛋白质的氧化,避免重金属对目标蛋白的破坏,避免微生物生长,避免蛋白酶对目标蛋白的降解。

4.尽可能置于冰上或者在冷库内进行操作。

5.蛋白浓度不要太稀。

6.除非是进行聚焦层,否则需要合适的pH环境,防止所使用的缓冲溶液pHpI相同,使蛋白质的沉淀得以避免。

 

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发布时间:2020-02-24 00:00:00

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